Sonovitro®FUAuto全自動超聲轉染系統

Sonovitro是專門針對超聲靶向遞送實驗而設計的超聲轉染實驗裝置。儀器主要由超聲發生器、自動化傳動系統、實驗操作平臺以及專用孔板等部件和模塊組成,旨在提升超聲介導基因轉染實驗的效率。


  • 商品介紹
  • 規格參數

  • Sonovitro?FUAuto的技術應用背景

    現今,基因治療領域不斷取得新的突破,它在腫瘤、心血管系統疾病及中樞神經系統疾病等多種疾病的治療上有著廣闊的應用前景,而其主要障礙并非是缺少理想的目的基因,而是缺乏安全有效的基因遞送方法。近年來,超聲因具有靶向遞送基因至細胞和組織的潛能而備受關注,研究表明,超聲輻照可誘發空化效應,使細胞膜通透性增加,有利于大分子物質的胞內遞送,且可避免其他轉染方法的副作用。超聲靶向遞送技術Ultrasound Targeted Microbubble Destruction,UTMD可靶向遞送特異性基因,已成為一種新型、簡便、有效的基因遞送方式。


    關于Sonovitro?FUAuto全自動超聲轉染系統

    Sonovitro?FUAuto是專門針對超聲靶向遞送實驗而設計的超聲轉染實驗裝置。儀器主要由超聲發生器、自動化傳動系統、實驗操作平臺以及專用孔板等部件和模塊組成,旨在提升超聲介導基因轉染實驗的效率。

    Sonovitro?FUAuto采用了超聲遞送技術,具有安全、高效、便捷、重復性強等優點,適用于臨床試驗研究中的基因轉染Gene Transfection和藥物遞送Drug Delivery領域中的實驗研究。傳統的外置超聲裝置,操作過程中探頭直接或間接與細胞接觸,容易造成細泡污導致實驗失敗,且實驗不可批量化操作。


    Sonovitro?FUAuto的轉染實驗操作以卵巢癌細胞(A2780)為例

     

    實驗流程

     

    轉染前的準備

    1.      細胞鋪板 選用處于生長對數期的狀態良好的細胞,用胰酶消化,離心;加入完全培養基重懸;進行細胞計數后,以每孔1×105個細胞接種至24孔,繼續培養24h。如果細胞是近期復蘇的凍存細胞,在轉染前至少傳代兩次。

    2.      微泡準備 制備好所需的微泡(制造商研發團隊制備)后,4℃保存。

    3.      質粒準備 選用純度較高的無內毒素質粒,OD260/OD280≥1.8。

    4.      培養基準備 配置好所需的不同培養基,并確保培養基沒有被細菌、真菌或支原體污染。

    轉染

    1.      首先將細胞培養板置于光鏡下觀察細胞狀態,包括培養基顏色、細胞形態、細胞密度,若出現污染或狀態欠佳,則不對該板細胞進行轉染。

    2.      準備好所有的所需物資,放置在超凈臺內,包括微泡、質粒、培養基、PBS緩沖液、EP管等,避免多次來回走動。

    3.      轉染前1小時更換無血清培養基,每孔加入100μl Opti-MEM。

    4.      微泡與質粒準孵育。每孔微泡用量為10 μl,所需質粒量為10μg,吸取微泡與對應質量的質粒混合孵育15min后,加入Opti-MEM培養基,使每孔的轉染體系為300μl,繼續孵育5min。

    5.      吸去培養板的培養基,用PBS沖洗細胞2次。將微泡質粒混合物加入孔內,輕柔前后搖動培養板使其分布均勻。

    6.      在Sonovitro?FUAuto水槽中加入330ml無菌水,以保證超聲聲頭與孔板之間可以經水完全接觸。移動孔板,使目標孔位與探頭共圓心。選用超聲參數為:頻率為1MHz,強度為1.0w/cm2,占空比為20%,輻照時間為1min。每孔輻照后,用無菌紙或紗布擦干孔板底部水分,噴灑酒精后放回培養箱繼續培養。

    完成后的操作

    1.      轉染后4-6h進行換液。吸棄原有培養基,用PBS洗滌2次,加入完全培養基300μl,繼續放回培養箱培養。

    2.      在轉染后24h,將培養板置于熒光顯微鏡下觀察熒光表達。

     

    如需咨詢或了解實驗方案及更詳細的實驗應用方案,請致電制造商或將需求發送[email protected]獲取更多的幫助。




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